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About this book
In Produktionsprozessen mit filamentösen Pilzen werden hĂ€ufig Sporen als Starterkulturen fĂŒr submerse Kultivierungen verwendet. Dabei ist es essentiell, spezifische Charakteristika der im Inokulum enthaltenen Sporen zu kennen, da diese den Erfolg und die Reproduzierbarkeit der Kultivierung beeinflussen können. Aufgrund fehlender Analysemethoden war es bislang nicht möglich, spezifische EigenÂŹschaften von Sporen im Inokulum zu erfassen. Im Vordergrund dieser Arbeit steht daher die Etablierung von Verfahren zur Charakterisierung und QualitĂ€tsbestimmung von Sporen in Seedingkulturen. Anhand des Modellorganismus Aspergillus ochraceus wird geÂŹzeigt, dass ein auf Konfokaler Laser Scanning MikroskoÂŹpie basierender Lebend/Tot-ViabilitĂ€tstest zur Quantifizierung membranintakter, keimfĂ€higer Spo-ren geeignet ist. Weiterhin wird dargestellt, dass der FDA-Assay die BiomasseÂŹaktivitĂ€t in der Anfangsphase submerser Kultivierung erfasst und damit erste VorausÂŹsagen ĂŒber den Erfolg der Kultivierung möglich sind. Zudem wird die AnwendbarÂŹkeit des Tetrazoliumsalzes MTT zur Detektion der respiratorischen AktivitĂ€t von SporenÂŹsuspensionen bestĂ€tigt. Der Polyolgehalt der Sporen korreliert mit dem Keimungspotential und kann damit ebenfalls als QualitĂ€tsindikator von Seedingkulturen herangezogen werden. Die in dieser Arbeit etablierten Analysemethoden werden zur Identifizierung optimaler Sporulationsparameter fĂŒr maximale Sporenausbeuten mit hoher SporenqualitĂ€t eingesetzt. Dabei korrelieren die ErgebÂŹnisse der verschiedenen Charakterisierungsmethoden untereinander sowie mit dem BioÂŹmasse-wachstum und der Biotransformationsleistung im submersen Kultivierungsprozess.Mit Hilfe der hier entwickelten Methoden zur Charakterisierung und GĂŒtebestimmung von SeedingÂŹkulturen sind nun bereits vor Beginn der Kultivierung Aussagen ĂŒber deren Erfolg bzw. Misserfolg möglich. Weiterhin können RĂŒckschlĂŒsse auf optimale Sporulationsbedingungen erhalten und zukĂŒnftig Sporensuspensionen hoher ViabilitĂ€t hergestellt werden, womit ein Beitrag zur QualitĂ€tssicherung des Kultivierungsverfahrens geleistet wird.
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Information
Table of contents
- Inhaltsverzeichnis
- Einleitung und Zielsetzung
- Aktueller Stand der Forschung und Technik
- Material und Methoden
- Ergebnisse und Diskussion
- Zusammenfassung und Ausblick
- AbkĂŒrzungen und Symbole
- Literatur